對于DNA的性質(zhì),我們之前已經(jīng)說完了。
所以――
咳咳(~O~)我們將要對dna進行復(fù)制。
在談基本的復(fù)制過程之前,我們先說一說,DNA復(fù)制所需要的技術(shù)是PCR技術(shù),在該過程中,我們還需要準(zhǔn)備相應(yīng)的物質(zhì)。
分別有解旋酶(用于解旋DNA雙鏈,使得DNA雙鏈打開),DNA母鏈(為PCR技術(shù)提供模板),原料4種脫氧核苷酸(為PCR技術(shù)提供相應(yīng)的合成子鏈的原料),DNA聚合酶(用于催化合成DNA子鏈),引物(使DNA聚合酶可以順利的從3'端開始連接脫氧核苷酸)
插播一個小貼士。
DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,分為兩端一般?'端為-OH端(羥基端)和5'端為-P端(磷酸基團端)。
還有一個就是,DNA在80~100攝氏度的范圍內(nèi),DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)將會接體,雙聯(lián)分開,此過程稱之為變性。
接下來我們就對PCR的反應(yīng)過程進行具體的操作。
一般而言,PCR技術(shù)通常會經(jīng)歷30多次循環(huán),每次循環(huán)都包括:變性,復(fù)性,延伸等多個過程。
并且在這種實驗過程中,我們需要進行一次預(yù)變性,目的就是用來增加DNA變相的概率,防止造成不必要的浪費。
接下來咱們就共同進入PCR技術(shù)的實驗過程中。
首先就是將DNA模板,四種脫氧核苷酸,引物,DNA聚合酶進行投料。
之后呢,我們就將溫度升高至95攝氏度了,使DNA進行變性。從而使得DNA雙鏈進行解旋,形成兩條單鏈。
變性之后我們還需要復(fù)性。
所謂復(fù)性就是恢復(fù)原來的性質(zhì)。在這個過程中,我們需要做的就是將95攝氏度的高分,慢慢的將集到55攝氏度。
在復(fù)性的過程中,我們還需要引物的作用,引物一共有兩種,它們會和兩條DNA單鏈結(jié)合,以便于后續(xù)的反應(yīng)進行。
當(dāng)引物和DNA單鏈結(jié)合之后,我們還要將溫度升高到72攝氏度進行延伸。延伸其實就是平時的DNA的復(fù)制。雖然條件不同,但是性質(zhì)大體相似。
之后我們就是要將上述的三個步驟重復(fù)30多次。
這樣一個回合下來,我們就完成了PCR的所有過程。
不過在此過程中,我們要注意些問題。
首先就是我們需要使用相關(guān)的儀器,其中非常重要的就是微量離心管,這種離心管實質(zhì)上就是一種薄壁塑料管。它的總?cè)莘e是0.5毫升,別看它小巧,材料還比較低端。你是在實驗中,可是起到了必不可少的作用呀!
還有一個就是在我們傳統(tǒng)工藝技術(shù)中必須應(yīng)用的一項,就是所有的儀器試劑,都需要使用高壓蒸汽滅菌法,進行滅菌處理。這是使得不會有雜菌進行污染、干擾實驗結(jié)果,來讓這個實驗順利的完成。
在這里我們的PCR技術(shù)所需要的緩沖液和酶的保存方法還有講究呢,因為該實驗當(dāng)中的緩沖溶液和酶都需要在零下20攝氏度的環(huán)境內(nèi)儲存,這樣才能防止酶變性失活,或者是酶意外受損。從而間接的防止反應(yīng)速率下降。
這就是我們的多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),擴增DNA片段的實驗的全部過程了,在這里我們的傳統(tǒng)工業(yè)技術(shù)也終于完成了,
但是,
生物永不止境,以后就生物將會有更加絢麗的前途與風(fēng)景。
加油吧!少年!
加油吧!支持我的每一位讀者!
你們一定會有一個更加絢麗的前途。
就和生物技術(shù)一樣,能力永無至境,能力會永遠得開發(fā)出來。
成功的曙光就在前方照亮著你,加油!
采曉天
幾經(jīng)波折,我們的傳統(tǒng)工藝技術(shù),終于完成了。在這里,我想深情的說:大壞蛋!(つд?)~打死你~~(??ˇ?ˇ??)哼!都怪你,(*?????*)?差一點點就收到著刀片了。心中是百般滋味呀……