對于培養(yǎng)基而言,我們已經(jīng)嘮說過了完全培養(yǎng)基,也就是營養(yǎng)培養(yǎng)的。
之后還有選擇培養(yǎng)基,咱倆用尿素的細菌一塊嘮一嘮。
鑒別培養(yǎng)基是如何應(yīng)用與操作的呢?
對于。細菌的計數(shù)而言,我們必須使用稀釋涂布平板。這樣我們才可以對細菌的數(shù)量進行具體的操作與計數(shù)。
而且菌落的個數(shù)則是在30到300之間的平進行計數(shù),這樣可以有效的減少一些不必要的誤差影響。
在操作時為了防止一些不必要的操作造成的誤差,我們需要在一個相同的稀釋倍數(shù)下設(shè)置最少三個培養(yǎng)基。并且取這些培養(yǎng)基上菌落的平均值。
在統(tǒng)計和記錄的過程中,我們還需要設(shè)置一個空白對照,這樣可以提高實驗的可信度,排除培養(yǎng)基被污染的因素。
對于細菌菌落的計數(shù)有哪幾種方法呢?
大體可以分為兩種方法:
第一種是直接計數(shù)法,這種計數(shù)法。會比實際菌落數(shù)目要低,因為會有多個細胞連接在一起時,在平板兒上看到的只能是一個菌落而無法區(qū)分。
第二種方法就是顯微鏡直接計數(shù)法。這種計數(shù)法要比實際菌落數(shù)要高,因為它不需要進行細菌的培養(yǎng),而是直接在顯微鏡下觀察。這樣無法辨別細菌的死活,如果是死細菌也會被計算在內(nèi)。因此會導(dǎo)致所測量的數(shù)值比實際多。
之后就要進行具體的操作了。
首先要對尿素細菌的選取的話,我們需要進行土壤取樣,正常來說是選擇距地面3到8厘米處的土壤這樣的土壤,還有細菌的數(shù)目,通常來說會比較豐富。
之后,我們需要將樣品進行稀釋。在稀釋時,要選擇以梯度稀釋為原則,這樣可以有效地控制數(shù)目,而且能明確稀釋倍數(shù),便于結(jié)束。
最后我們就需要進行培養(yǎng)和觀察。
觀察時要注意細菌的形狀,大小,顏色還有菌落的溶解程度等。操作中需要注意的一些事項有:
一鐵鍬和信封在使用之前需要進行滅菌,防止鐵鍬和信封上存在的細菌對我們的實驗結(jié)果造成影響與干擾。
二取土壤時,要在酒精燈火焰旁盛取。
三培養(yǎng)皿放置時需要倒置,并且要把培養(yǎng)皿的皿底上注明培養(yǎng)基的種類、培養(yǎng)日期、稀釋度等,這樣可以便于日后可以明確具體對內(nèi)容與信息的了解。
四尿素分解菌合成酶的時候,合成的是脲酶。這種細菌可以分解尿素使尿素轉(zhuǎn)化成氨,這時產(chǎn)物遇見酚紅指示劑,就可以使指示劑變紅。
如果在上回所說的檢驗大腸桿菌的話,我們需要加入伊紅美藍染色劑。這樣操作后,細菌的會變黑,之后也可以用于技術(shù)檢測了。
培養(yǎng)分解尿素的細菌時,要以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進行培養(yǎng),這就是鑒別培養(yǎng)基。也是我們需要操作的培養(yǎng)基。
這種培養(yǎng)基的特點就是可以抑制或阻礙其他微生物的生長繁殖,允許特定的生長在這里。因此我們就允許是可以分解尿素的細菌進行生長。
那么我們?nèi)绾螜z測,每個樣品中的菌落數(shù)量,我們就需要用一個公式進行演示:
C×V÷M
這其中,c代表的是某梯度下細菌溶液的濃度
V指板上生長的平均菌落數(shù)
M代表的是涂布平板時所需要的稀釋度的體積,即m代表稀釋度的倍數(shù)
一系列的體系操作與注意事項完成,這個實驗也就完成了。
采曉天
這就是選擇培養(yǎng)基!有什么想吐槽的,歡迎留言。